慢病毒滴度测定，MOI值计算，包病毒➕筛药tips

🌟今日分享： 慢病毒包装的详细protocol 筛puro构建稳株的方法和注意事项 慢病毒滴度测定方法 MOI值计算 基本包括关于慢病毒感染细胞的所有要点，需要的友友就往下看👇🏼 ✅慢病毒滴度 表示每毫升病毒液中具有感染能力的病毒颗粒数量，说白了，就是病毒效果好不好的指标。 一般我们看重的是功能滴度，计算实际有感染性的病毒颗粒，详细内容看P1和P2哦～❗️ 🌟影响慢病毒滴度的两个因素： 1、工具细胞的状态和密度：70%时可以开始包病毒，不宜过密；一定要用状态极佳的细胞，不然细胞吐出的病毒颗粒是“不健康”的 2、病毒浓缩液效率：病毒浓缩效果好，病毒滴度就高，市面上有很多病毒浓缩试剂盒，个人感受比较好的是[吉满生物]的，20ml病毒液加5ml浓缩液就可以，用量少，浓缩的病毒滴度也高❗️ ✅MOI值 表示平均每个细胞被感染的病毒颗粒数 例如：MOI🟰1，表示平均每个细胞感染1个病毒颗粒 易感染细胞，例如HEK293，可选择MOI为1～5 难感染细胞，例如悬浮和原代，可选择MOI为1～100 ⚠️若MOI值过高，可能导致细胞毒性，细胞状态会变差，干扰实验结果‼️这种情况细胞是养不起来的，做了也白搭，选择合适的MOI值很重要。 ✅包病毒➕感染细胞protocol，筛药tips 详细内容在图4～图6哦～[害羞R] 🌟尽可能用少的细胞去感染，大概50万 🌟对于难感染的细胞，浓缩后的病毒比病毒原液效果好 🌟感染细胞换液后，初期保持密度，减少传代次数 ⚠️ps：病毒浓缩时要先过滤，之前也发过自配浓缩液的配方，大家可以参考，吉满生物的慢病毒浓缩试剂盒比我自配的好用很多～[棒R]🌟1、自配的加到细胞里可能会有很多peg8000的结晶，有很多杂质在里面，而吉满生物的就不会，感染后的细胞依旧是比较干净的状态； 🌟2、用量少，浓缩效果好 吉满生物：20ml病毒液➕5ml浓缩液即可，有条件的课题组还是建议买商品化的去浓缩[赞R]