细胞培养基中的添加剂主要用于提供额外的营养、维持特定的环境条件、促进细胞生长和防止污染等。添加剂的选择和使用取决于细胞类型、培养需求和实验条件,它们共同作用确保细胞在体外培养环境中能够健康生长和分裂。
各种添加剂的功能1. L-谷氨酰胺(L-Glutamine)
是细胞生长的必须氨基酸,为培养的细胞提供重要的能量来源。脱掉氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。
(推荐产品:埃泽思L-谷氨酰胺(100X)细胞培养级别 AC-1001078)
2.丙酮酸钠
作为额外的碳来源补充到细胞培养基中,支持细胞能量代谢。
(推荐产品:埃泽思丙酮酸钠 AC-1001109)
3.Hank′s 平衡盐溶液(HBS)
是一种广泛用于细胞培养和组织处理的溶液。这种溶液具有平衡的离子组成,能够维持细胞的渗透压和pH值,使其在实验过程中保持良好的生理状态。
(推荐产品:埃泽思HBSS平衡盐溶液(含钙.镁)/D-Hank's AC-1001108;HBSS平衡盐溶液(不含钙.镁)/D-Hank's AC-1001074)
4.NaHCO3-CO2缓冲系统:
在细胞培养中,NaHCO3-CO2缓冲系统用于维持培养液的pH值在适合细胞生长的范围内(通常为7.2-7.4)。这有助于确保细胞代谢的正常进行和生长。
5. Hepes溶液
是一种弱酸,中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸,主要作用是防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下,观察细胞时培养基脱离了 5%CO2 的环境,CO2 气体迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此时可以维持 pH7.0 左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES。神经细胞原代培养的过程中能用到。
(推荐产品:埃泽思HEPES缓冲液 AC-1001077)
6. MEM非必需氨基酸
用于补充细胞培养基中的氨基酸,以促进细胞生长和活性。特别适用于小鼠胚胎干细胞(ES)和小鼠诱导多能干细胞(iPS)的体外造血分化。非必需氨基酸意味着这些氨基酸可以由生物体自身合成,不需要从外部环境获取。这些氨基酸的补充可以减少体外细胞的生物合成负担,同时刺激细胞生长和延长培养细胞的活力。
(推荐产品:埃泽思MEM非必需氨基酸 AC-1001110)
7. 酚红
酚红在培养基中用作pH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。酚红本身对生物制品质量并不会产生影响,可以通过纯化技术去除,但酚红在无血清培养基可能带来细胞内钠/钾失衡,影响细胞生长,当然这种作用能被血清所中和或减轻。酚红并不是培养基中必需的一种成分。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用,(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。
8.bFGF 和 EGF
bFGF是一个肝素结合的多肤类丝裂源,广泛分布于各种组织中。bFGF 是一种重要的细胞增殖分化调节剂,可刺激多种细胞的增殖。bFGF 主要是与细胞膜上FGF受体结合发挥作用,刺激与增殖有关的基因表达。同理EGF(上皮生长因子), 是人体内的一种活性物质,由53个氨基组成的活细胞,刺激表皮细胞生长因子受体之酪氨酸磷酸化,达到修补增生肌肤表层细胞,对受伤、受损之表皮肌肤拥有绝佳之疗效,其最大特点是能够促进细胞的增殖分化。
9.胰岛素
在无血清细胞培养液中,常添加胰岛素以维持细胞生长,调节细胞对葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的摄取、利用和贮存,同时抑制糖原、蛋白质和脂肪的分解。
10.抗生素
用于防止微生物的污染,保持细胞生长良好的状态。
(推荐产品:埃泽思青霉素-链霉素溶液 AC-1001039;两性霉素B(250ug/mL) AC-1001089)
细胞培养基添加剂的应用细胞培养基添加剂的选择
细胞类型特异性:不同类型的细胞可能需要特定的添加剂组合,以满足其生长需求。
原代细胞:可能需要特定的生长因子或提取物,如血清。
干细胞:可能需要特定的非必需氨基酸、B27补充剂等。
肿瘤细胞:可能需要特定的生长因子或激素。
实验目的导向:根据实验目的的不同,可能需要选择特定的添加剂来调节细胞的行为。
无血清培养:需要添加替代血清的成分,如白蛋白、转移因子等。
低氧培养:可能需要添加抗氧化剂或特定的缓冲剂。
长期培养:可能需要添加抗衰老因子或抗细胞凋亡因子。
添加剂的优化组合:通过优化添加剂的组合,可以提高细胞培养的成功率和效率。
细胞培养基添加剂的使用方法
添加剂的稀释和添加:正确稀释和添加添加剂是确保细胞培养成功的关键步骤。
监测细胞生长和形态:在使用添加剂的过程中,需要密切监测细胞生长和形态的变化,以便及时调整培养条件。
添加剂的安全性和毒性:了解和控制添加剂的安全性和毒性是细胞培养过程中不可忽视的问题。
细胞培养基添加剂的潜在应用
疾病模型建立:细胞培养基添加剂可以帮助建立更接近生理状态的疾病模型,促进相关研究的开展。
药物筛选和开发:添加剂可以用于筛选和开发新的药物,为疾病治疗提供新的可能性。
再生医学和组织工程:在再生医学和组织工程领域,细胞培养基添加剂可以促进细胞的分化和组织的形成。
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