疫苗接种反应的水平和持续时间取决于许多因素，在疫苗接种过程中需要充分考虑这些因素。仅仅描述一种可以在特定情况下预防感染的特定IBV 疫苗是不够的，因为监管要求通常会受到挑战。

1.压力和疫苗接种

根据 Dantzer 的说法，应激是“对环境刺激的非特异性反应，是对鸟类适应的生理和行为体验提出极端要求的结果”。各种压力都会降低鸟类的免疫系统，这与温度波动、相对湿度高、营养不良、寄生虫感染和疾病状况等多种因素有关。疫苗接种应在条件良好的健康鸡群中进行，以避免应激。

一项研究表明，有证据表明压力和抗体对疫苗接种的反应之间存在负面印象，这是与胸腺相关的疫苗最表面的，是在接种后很长一段时间内计算的，由于皮质酮激素水平持续升高超过稳态负荷，一段时期的慢性应激被发现会显着减少 T 辅助细胞、T 淋巴细胞和 B 淋巴细胞的总数 。然而，幼鸡的长期应激会导致淋巴或免疫器官过早退化，例如胸腺、法氏囊和脾脏。对应激鸟类的身体代谢和免疫系统的综合影响不能耐受疫苗的接受；最终尚不清楚它们是否能适当地提供保护。

2.保护研究方法

保护研究并不是一种简单的应用方法，但在设计此类研究时考虑了几个因素。使用不同的方法进行体内保护研究，使用疫苗接种和挑战组的总体概念来评估疫苗是否可以防止局部菌株的特定挑战。

阿维森等人建立了一种不同的肺部病毒清除测试方法，通过气管进行特定的疫苗接种和攻击。这项研究允许确定超过 50% 的保护分数指数作为保护水平，而 90% 的环具有定期活动 。通过在体外纤毛停滞试验中滴定肺匀浆来评估，疫苗的效价阻止了攻击病毒在肺部的复制。研究使用肺部样本而不是气管来最大限度地降低检测残留效应的风险，因为肺组织支持 IBV 生长至与气管中相似的水平。疫苗接种后第 21 天，针对三组强毒力 IBV 菌株挑战的 IBV 疫苗接种计划刺激了纤毛保护，如图所示图3。

图3传染性支气管炎病毒 (IBV) 疫苗接种计划在疫苗接种后第 21 天针对三种强效 IBV 菌株挑战刺激了纤毛保护。

3.疫苗和免疫程序

在疫苗接种之前，需要根据流行病学研究、强毒病毒的流行情况、零星爆发的数据、准确的诊断、单一或联合IBV疫苗、疫苗效力以及监测家禽卫生系统来修订计划。

免疫通常取决于确定其针对多种病毒变种的有效性的挑战；特定时间有利于病毒、减毒活疫苗或灭活疫苗的繁殖以及监测滴度水平或测定基线。重要信息详细说明了鸟类免疫是保护性的还是挑战。因此，如果存在某些滴度限制或病毒挑战正在现场传播，则不建议评估当前的免疫计划。由于IBV有多种血清型，单一血清型的IBV疫苗不能提供超过50%的保护（纤毛评分≥20），因此根据一些临床研究，它不足以抵御异源攻击。

“多/单价”疫苗的替代类型，至少有两种 IBV 疫苗血清型，或根据农场和邻近地区的高挑战应用新的血清型，通过相同的血清型进行流通。因此，可以通过血清分型测定来鉴定鸡群中出现的 IBV 强毒血清型，并确认特定的疫苗接种计划以预防新的 IB 分离株。

与重组疫苗、灭活疫苗和活疫苗相比，强毒活疫苗更有效，并且能够减少现场挑战病毒的脱落，这些疫苗与现场挑战病毒的同源性不高。大多数疫苗在感染阶段没有活性，禽类在接种疫苗时已被感染。由于急性感染，免疫器官不能充分发挥免疫系统的激活作用，因为鸡不能产生令人满意的抗体滴度水平。

图4、0-30 周血清学图中九个肉种鸡舍的几何平均滴度（IDEXX，美国）。雏鸡在小母鸡阶段接种传染性支气管炎 (IB) 减毒活疫苗，然后接种 IBV 变种疫苗和灭活 IBV 灭活疫苗 20 周。在 9 个鸡舍中，House-1 和 House-4 与其他鸡舍相比，接种后的滴度非常低。GMT滴度仍低于标准，表明接种过程中各种相关因素的接种不当（X轴，周；Y轴，几何平均滴度（GMT））。

4.小组规模和样本数量

样本采集对于病毒感染期间和病毒感染后的诊断和鉴定的确认非常重要。在IBV急性感染中，大多数禽类都有相似的典型临床症状；那么，可以减少样本数量。至少五只鸟足以获得通过分子测定成功检测感染的更高可信度。

血清学方面，感染后检测到的鸟类采集样本较多，特异性较高；然而，应考虑假阳性结果的成本和风险。在免疫禽类的慢性感染中，存在少量病毒，患病率较低，但需要更多的禽类来检测感染。在农场中，疫苗接种后应从该组或每个农场鸡群中至少采集 20-25 只禽类样本，否则结果无法提供良好的统计数据分析。

一些研究人员演示了纤毛停滞保护评分系统 (CPSS) 的采样，该系统用于使用五级（分数 0-4）评分系统从每组 10 只鸡收集 10 个气管器官培养物 (TOC) 。欧洲官方出版物的原则报告称，IB 疫苗的效率需要对每组不少于 20 只鸡的 10 个 TOC 使用 CT 的二项式解释，正如许多研究中所使用的那样。鸟类受到保护，因为 10 个环中不少于 9 个呈现出正常的纤毛活动 。

5.疫苗接种/感染时的免疫力

获得性免疫力的水平取决于许多因素，特别是在接种疫苗或接触感染时。疫苗与免疫系统合作产生与鸟类自然感染相同的免疫反应。与自然感染相比，体液免疫反应在刺激某些水平的免疫反应方面具有显着作用。

一些研究人员报告说，疫苗接种是身体因先前接种疫苗或早期感染而产生的免疫发展过程。接种疫苗的鸡感染后，体液反应通常会增加，但根据农场当前的感染暴露情况，体液反应可能会逐渐下降或延迟。因此，与未接种疫苗的鸡相比，接种疫苗的鸡的抗体测试敏感性可能要低得多。

一项研究报告了对接种疫苗和未接种疫苗的鸡进行实验性 IBV 感染，结果表明，与未接种疫苗的鸡相比，接种疫苗的鸡受到同源病毒攻击的时间短得多，数量也少得多。

感染 4 周或疫苗接种后 6 周后，可以通过血清学检测来鉴定不同水平的体液反应。中和抗体（抗IBV IgA）反应似乎会随着攻击而发生，并且随着疫苗接种和攻击之间时间的推移而变得更加增强。例如，疫苗需要一定的时间来产生机体免疫力，随后仔细研究初次免疫和后续加强免疫的最佳时期，以期在禽类中产生最佳的免疫反应。

免疫者要么过早或过晚进行二次疫苗接种，否则可能无法充分加强免疫刺激，导致免疫保护效果不佳。为了延长建立的免疫力，初次免疫后间隔2至4周进行二次免疫；那么，可能需要额外的灭活疫苗来形成完整的免疫保护，如图5所示。

此外，每年需要进行加强注射，以确保免疫系统仍然正常运转并增强免疫力。虽然早期接种 IBV 对循环母体抗体有负面影响，直到 4 周，但局部抗体可以补贴呼吸道上皮细胞免受同源 IBV 攻击的局部保护。因此，初次疫苗接种（活疫苗和灭活疫苗）可以克服免疫差距，因为它们需要在母源抗体（MDA）下降期间而不是在后期疫苗接种中保持平衡以产生主动免疫（图5B）。

图5 ( A ) 初级和次级免疫反应的活动与鸡疫苗接种相关，通过在主动免疫下降期间每年重复加强免疫反应，在蛋鸡的整个周期中维持最大水平的免疫反应； ( B ) 评估被动免疫下降与主动或获得性免疫开始之间的免疫间隙或无保护期，导致鸟类不受保护和受到挑战，因为主动免疫在免疫间隙中得到保护

--未完待续