微生物限度检验仪检测水质的具体操作流程是怎样的?以下是微生物限度检验仪检测水质的一般操作流程:
1.实验准备
仪器与器材:准备好微生物限度检验仪、真空泵、滤杯、滤膜、镊子、剪刀、酒精灯或火焰灭菌器、硅胶管、收集瓶、无菌采样瓶、量筒、移液管等,并确保其清洁干净且能正常使用.
试剂与培养基:根据检测需求,准备 pH7.0 氯化钠 - 蛋白胨缓冲液等稀释液,以及营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基等适合不同微生物生长的培养基,并检查其是否在有效期内.
滤膜处理:选取合适孔径的滤膜,一般为 0.45μm 或 0.22μm,将其浸泡在纯化水中 3-5 分钟,然后用镊子取出,放在滤杯的滤膜支撑网上,用火焰灭菌器快速消毒滤杯及滤膜支撑网.
2.样品采集与处理
水样采集:使用无菌采样瓶采集水样,采样时应避免污染,可根据需要选择不同的采样点和采样量,如对于饮用水,可在水龙头处先放水一段时间后再采集;对于地表水或污水,应选择有代表性的采样点采集一定深度的水样.
水样稀释:如果水样中的微生物数量较多,需要对水样进行适当稀释,一般采用 1:10、1:100、1:1000 等梯度稀释,用 pH7.0 氯化钠 - 蛋白胨缓冲液作为稀释液,如取 10ml 水样加入到 90ml 缓冲液中,得到 1:10 的稀释液.
3.过滤集菌
安装仪器:将硅胶管一端套在过滤装置的出液口,另一端套在收集瓶的进液口;再取另一根硅胶管,一端套在收集瓶的抽气端,另一端通过不锈钢宝塔接头与真空泵相连.
过滤操作:将稀释后的水样注入滤杯内,启动真空泵,打开相应阀门,使水样通过滤膜进行过滤集菌,过滤过程中要注意观察滤速,若过滤速度过慢或无法过滤,应检查管路连接是否漏气、滤杯密封性是否良好、水样中是否含有较多不溶性颗粒或悬浮物、不锈钢网片及底座出液孔是否堵塞等问题.
取出滤膜:待水样过滤集菌结束后,且滤膜上没有水珠时,关闭真空泵开关,用无菌镊子先取出密封圈,再取出滤膜,注意不要碰到滤膜的集菌面.
4.培养与观察计数
贴滤膜:将取出的滤膜菌面朝上,平贴在事先准备好的培养基上,注意不要有气泡,若使用液体培养基,可将适量液体培养基注入滤杯内,使其覆盖滤膜表面即可.
培养:将贴有滤膜的培养基放入生化培养箱或恒温培养箱中,按照不同微生物的培养要求设定温度和时间进行培养,如营养琼脂培养基用于培养细菌,一般置于 30-35℃培养 3 天;玫瑰红钠琼脂培养基用于培养霉菌和酵母菌,一般在 23-28℃培养 3-5 天.
观察计数:在培养过程中,逐日观察培养基上微生物的生长情况,并记录菌落数量,培养结束后,根据菌落形态、颜色等特征进行鉴别和计数,计算出每毫升水样中的微生物数量,并按照相关标准进行结果报告