文：回溯档案

编辑：回溯档案

双孢蘑菇是世界上栽培最多的蘑菇，蘑菇种植的主要限制之一是绿霉病，攻击性木霉f. aggressivum和T.是一种侵略性的绿色霉菌生物型，在北美和欧洲分别造成流行病和100%的产量损失。

T.aggressivum f. 据了解，aggressivum发生在北美，但匈牙利和土耳其也有报道，表明除北美外，这种侵略性的绿色霉菌生物型正在蔓延，并对其他蘑菇种植国家构成新的风险。

尽管绿色霉菌的侵袭性生物型造成了破坏性的产量损失和流行病，但人们对其在蘑菇种植中的管理知之甚少，此外在蘑菇病原体的管理中，由于蘑菇菌丝体的敏感性，很少有化学品被登记。

双孢菌对包括化学物质在内的各种分子，此外采摘用于销售的蘑菇存在很高的农药残留风险，由于在将化学品施用于覆土后，蘑菇会在短时间内出现并达到足够的尺寸以供采摘。

农药抗性及其成本也是蘑菇种植中的其他问题，由于这些原因，蘑菇行业在人类和环境健康以及食品安全方面面临着压力，因此在蘑菇种植中的绿色霉菌管理中应制定替代管理策略。

关于替代管理实践，使用精油进行了几项体外研究，然而成本和体内应用的困难以及精油对A.菌丝体的不利影响，双孢菌是必须处理的问题。在这方面，生物防治以其针对目标微生物、成本效益高、环境友好等特点而脱颖而出。

在蘑菇种植中的绿色霉菌管理方面有一些生物控制的例子，然而体外实验的结果可能无法反映在体内，因为纽扣蘑菇是在富含微生物的介质中培养的。

在这样的介质中，大量的真菌和细菌参与从互利共生到拮抗的复杂相互作用，这些相互作用可能会影响A的任何生长阶段，双孢菌和蘑菇产量取决于同一培养基中微生物的存在。

此外堆肥和覆土中存在绿色霉菌时，可能会发生上述复杂相互作用的主要干扰之一，在这种情况下，应根据两个假设制定合理的生物控制策略：形成针对堆肥和覆土中绿色霉菌的生物防治方法。

因此，本研究的目的是(i)检查5种天然细菌分离株对T的两种分离株菌丝生长的影响，aggressivum和A的一种菌株，双孢菌体外(ii)评估细菌分离株和3种商业生物制剂对T.aggressivum f的两种分离株的生物防治功效，堆肥和覆土中的侵略性。

双孢蘑菇（蘑菇）菌株、蘑菇堆肥和覆土

A的商业白色菌株，双孢蘑菇、蘑菇堆肥和覆土来自土耳其安塔利亚省科尔库泰利县的SMSErsanlar公司，堆肥和覆土的商标分别是Ersan和?ivril。

覆土的成分由有机质、淤泥和各种元素（如C、N、P、K、Ca、Mg）组成，未对覆土土壤进行任何处理。

绿色霉菌分离物

这两种菌株?om1和K39此前分别于2015年从安塔利亚省?omakl?村和Akyar区的蘑菇堆肥中分离出来，分离株在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)上于25°C培养10天。

在这些条件下，它们最初形成白色菌落，4至5天后，菌落因孢子形成而开始变绿。

2019年，从蘑菇堆肥中分离出5种细菌（第3阶段），样品取自安塔利亚省科尔库特利县的蘑菇农场，这些细菌分离株被命名为MSG-5、MSG-11、MSG-15、SGM-1和SGM-2。

细菌分离株的鉴定

在体外检查了每种细菌分离株的形态和生化特征，通过将细菌与一滴3%KOH溶液混合来测定细菌分离株的革兰氏反应，细菌分离株的生化特征根据Bergey的细菌学测定手册的标准方法进行表征。

在实验中，为每个处理区安排了两个单独的对照，在阴性对照中，和细菌分离株/商业生物制品都被应用于堆肥，但只有A菌株，双孢菌在堆肥中生长。

在阳性对照中，不使用细菌分离物/商业生物制品，而仅将绿霉菌接种物加入到含有双孢蘑菇菌株的堆肥中，所有袋子在25°C、相对湿度85%至90%的条件下保存10天。

然后，将覆土（660克）添加到每个袋子的顶部。十天后，房间温度每天降低1℃，直至达到17℃，随后开始通风，从室外向房间提供氧气，从而降低房间内的二氧化碳水平。

每天用喷洒无菌水浇灌覆土，以保持湿润。随后出现A菌株的子实体（子实体），采摘双孢蘑菇、上市规格的蘑菇，每袋称重，分别计算每种处理、阴性和阳性对照图的产量值，通过比较两个对照图来评估每种治疗的功效。

统计分析

使用SAS9.1软件程序（SASInstituteInc.，Cary，NC，USA）进行方差分析(ANOVA)，每个实验中的每种处理分别使用4次和3次重复进行体外和体内实验。

在双重培养测试中，与对照相比，同一人工培养基(CEM)中每种细菌分离株的存在对两种T.aggressivum f.的菌丝生长均产生显着(P? 0.01)的抑制作用，攻击性和A . 治疗中的双孢菌。

在这方面，细菌分离株MSG-15（罗得西亚假单胞菌）和T.aggressivum f之间的相互作用发现了最高的生长抑制（46.60％），攻击性分离株?om1。然而，在细菌分离株SGM-2（解淀粉芽孢杆菌）和T.aggressivum f之间的相互作用中检测到最低的生长抑制（38.61%），攻击性分离株K39。

与对照相比，细菌分离株MSG-11（嗜麦芽寡养单胞菌）对A菌株的生长抑制高达56.94% ，在双培养试验中，双孢菌菌株SGM-1（解淀粉芽孢杆菌）对双孢菌菌株的生长抑制最低（31.23%）双孢菌。

堆肥实验的评估

细菌分离株/商业生物制品在接种T的堆肥中的应用，侵略aggressivum对A的产量有显着的影响（P <0.01）双孢菌，此外在堆肥实验中，真菌、处理以及细菌×处理的相互作用显着（ P<0.01）。

比较堆肥实验中各实验单元（小区）的平均产量，处理小区的产量值高于阳性对照，然而它们低于阴性对照，阴性对照地块的平均产量为547至449.66克，而处理地块的平均产量为506至378.33克。阳性对照地块的平均产量从393.66克到313.33克不等。

与阳性对照图相比，天然细菌分离株（MSG-5、MSG-11、MSG-15、SGM-1和SGM-2）比商业生物制剂（Tic-1、Tic-2和Tic）表现出更高的产量增加-3）在处理过的地块中。

在处理过的地块中，细菌分离株诱导的产量增加范围为40.56%至20.74%，而在商业生物制品的处理地块中，产量增加范围为30.64%至18.53%。

与阴性对照地块相比，天然细菌分离株的处理地块的平均产量下降了0.68%至9.69%，而商业生物制剂的处理地块的平均产量下降了6.52%至13.78%。

堆肥是A菌丝体生长的两个成分之一，蘑菇栽培中的双孢菌。在本研究中，这些处理导致堆肥实验中产量显着增加（ P?0.01），表明处理（细菌分离株/商业制剂）对T.aggressivum f的功效。

堆肥中的攻击性，然而似乎很难对这些处理的作用方式给出准确的解释，因为堆肥富含微生物群，包括各种细菌、真菌和酵母。在这样的环境中，A菌株的菌丝体。

双孢菌属在添加覆土之前，堆肥已定殖了近20天，指出在堆肥定植期间，堆肥中的革兰氏阳性菌受A的影响较小，双孢菌比革兰氏阴性菌强，表明A的相互作用。

堆肥中含有细菌的双孢菌，这一发现也可能意味着堆肥中革兰氏阳性菌的存在可能对A菌丝体的生长产生积极影响，双孢菌在这方面，在本研究中，革兰氏阳性细菌分离株MSG-5（枯草芽孢杆菌）通过抑制。

由于细菌和真菌之间发生多种相互作用，无论是在蘑菇种植过程中的堆肥还是覆土中，在任何这些基质中添加生物微生物都可能通过提高/降低产量对新兴蘑菇产生积极/消极影响。

在本研究中，通过比较堆肥和覆土实验，在堆肥中人工添加细菌分离物/商业生物制剂导致了更高的产量增加，并且对A.菌丝体生长和产量产生的不利影响较小。

双孢菌的含量高于覆土土的含量，同样桑特里奇，报道黄绿链霉菌A06对堆肥中的绿色霉菌比覆土更有效，在这种情况下，堆肥和覆土的功能和生物学差异可能与这些发现有关，因为A . 双孢酵母最初定植于堆肥，然后覆盖土壤。

结论

无论是革兰氏阳性还是革兰氏阴性，每种细菌分离株对于蘑菇栽培中绿霉菌的管理都至关重要，这对于堆肥中绿色霉菌的管理也更为重要，因为杀菌剂或其他替代管理措施可能对A的生长产生负面影响。

因此不能用于对抗堆肥中的绿色霉菌，蘑菇种植过程中堆肥中的双孢菌，根据本研究的结果可以推断，在堆肥和覆土中人工施用细菌分离物/商业生物制剂可能会通过抑制绿色霉菌来显着提高产量。

但也可能对A产生负面影响双孢菌，总体结果还表明，堆肥中绿色霉菌的生物控制可能比覆土更有效。

参考文献

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