异噻唑啉酮作为一种常见的杀菌剂，主要由5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（CIT）和2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（MIT）组成。
异噻唑啉酮是通过断开细菌和藻类蛋白质的生物键而起到杀生作用。异噻唑啉酮与微生物接触后，会迅速的抑制其生长，从而导致微生物的死亡，对常见细菌、真菌、藻类等具有很强的抑制和杀灭作用。
由于其高效、广谱、低毒的优点，从而广泛适用于水处理行业、化工行业、造纸、轻纺、水涂涂料、工业清洗等领域。
而目前针对其检测的仅有化妆品方面的国家或行业标准。今天，程诚小编就带您了解一下高效液相色谱法测定异噻唑啉酮含量的方法。
1、仪器与试剂
高压恒流输液泵，紫外可见可变波长检测器，超声波清洗器，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（CMI）和2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（MI）标准品，甲醇（色谱），水（双蒸水或纯净水）
2、色谱条件
色谱柱：C18色谱柱
流动相：甲醇：水=35:65（v/v）
流速：1ml/min
检测器波长：254nm
（CMI与MI标准品色谱图）
二、结果分析1、流动相的选择
CMI和MI标准品色谱图见上图。由于异噻唑啉酮在水和醇类溶解度较好，综合考虑，流动相选择甲醇-水体系。
当甲醇-水体积比为50:50时，计算CMI和MI的分离度R=1.34，不能完全分离；甲醇-水体积比为35-65时，计算得出CMI和MI的分离度R=3.20，能完全分离。
当甲醇-水体积比为30:70时，CMI和MI能完全分离，但峰形有拖尾现象，最终确定流动相甲醇—水体积比为35：65。
2、线性关系考察
用移液管移取标准品溶液1/2/4/6/8/10ml至于25ml容量瓶中，用流动相稀释到刻度，摇匀，045μm微孔滤膜过滤。
配成浓度为0.08/0.16/0.32/0.48/0.64/0.80mg/ml的标准溶液。进样量20μL，按上述色谱条件测定，以峰面积积分值为纵坐标，质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，分别计算其回归方程。结果表明在0.08-0.8mg/ml范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系。
程诚小编结语：研究表明，采用反相高效液相色谱法测定异噻唑啉酮的含量，具有操作简单、快速、峰形好、分离效果好、精密度和准确度高等特点，是进行产品质量控制的理想分析方法。
