一、动物实验基本方法指南
1、动物实验给药剂量计算方法
1、动物实验给药剂量计算方法
2、动物实验常用给药方式
2、动物实验常用给药方式
1、皮下注射。捏起皮肤,刺入针头,固定后即可注射
2、皮内注射。剪掉注射部位动物毛发,消毒,用皮试针头紧贴皮肤表层刺入皮内,针头上挑再稍刺入
3、肌肉注射。适合不溶于水而混悬状态的药物。选择肌肉发达、无大血管经过的部位,如臀部
4、腹腔注射。腹部消毒,在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进0.5CM,针头与皮肤45度角方向穿过腹肌刺入腹腔,此时应有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。多用大鼠小鼠
5、静脉注射。尾静脉注射(大鼠小鼠),前肢皮下静脉注射(豚鼠),耳缘静脉注射(兔)
6、淋巴囊注射。蛙类常采用此法,多选腹部淋巴囊,从大腿上端刺入,进入腹壁肌层,再进入腹壁皮下
7、灌胃法。灌胃针深度:3-4cm(小鼠),4-6cm(大鼠/豚鼠),灌胃量:0.2-1ML小鼠,1-4ml大鼠。
3、动物实验药品剂型的配置
在动物实验中药物应该优先选择纯粉(原料药),可以排除辅料的干扰剂量设计更加灵活。需要使用溶剂、助溶剂将药物配制成一定的剂型后给动物使用。优先选择无毒性、与药物无反应的溶剂。
1、水溶性药物配制。选用溶剂为纯水、或者生理盐水等水系溶剂,注射前建议微膜过滤除菌
2、水不溶或者难溶药物(脂溶性)配制。可以尝试使用植物油类,如大豆油、蓖麻油,橄榄油作为溶剂,或者添加助溶剂,如2%吐温-80,PEG400,丙二醇,泊洛沙姆,0.5%CMC-NA,10%Solutolβ-环状糊精,羟丙基β-环状糊精,甘油。如确实需要使用DMSO,请确保DMSO终浓度<5%。不建议使用乙醇、甲醇等有机溶剂。灌胃,混悬状态也可。
二、动物麻醉剂
1、水合氯醛;Chloral hydrate
纯度:>99%
溶解性:water>10mg/ml
常用浓度:5-10%,给药剂量300mg/kg(动物体重);给药方式腹腔注射:因具体动物情况不同,需要根据自己实验条件进行模式,信息仅供参考。
特点:麻醉较浅,麻醉持续时间较长,对鼠、兔肌肉松弛效果一般,可与乌拉坦合用,增强效果。
2、乌拉坦:乌来糖;尿烷 Ethy carbamate
纯度:>99%
溶解性:溶于水
特点:麻醉持续时间2小时左右,多用于鼠和兔的麻醉,腹腔注射,或者耳缘静脉(免)。常用剂量为1000mg/KG(体重),使用浓度20%,肌肉松弛效果较好,作用温和,可用于深度麻醉。
3、乙酰丙嗪 Acepromazine maleate
纯度:>98%
溶解性:水>10mg/MI
特点:常用于大型动物如犬和猫的辅助麻醉,肌肉注射,给药剂量0.1mg/kg(体重)
4、a-氯醛糖 a-Chloralose
总含量>98%
溶于乙醇,微溶于水特点:a-氯醛糖在动物实验中可用做麻醉剂,常用剂量50-80mg/kg,麻醉时间可达5-6小时。麻醉时间持续时间长,对心血管和呼吸系统抑制轻,但是麻醉浅,镇痛效果不佳,常伴有不自主兴奋
5、盐酸氯丙嗪,Chlorpromazine HCl
纯度:>98%
溶解性:水>50mg/ml
特点:可辅助增强麻醉效果,起镇定作用,腹腔注射,剂量3-5mg/kg(体重)
6、三溴乙醇(阿佛丁),2,2,2-Tribromoethanol
配制:将本产品和叔戊醇,混合以制备原液,三溴乙醇体积占66.7%,得到三溴乙醇浓度为1g/mL的母液:该母液应避光保存在冰箱中。施行麻醉前配置新鲜工作液,用后处理掉。文献中描述的大多数溶解在叔戊醇中的三溴乙醇含有无菌生理盐水。该工作液必须加热至溶解,加热时注意温度不要超过40度。
注射前配制:灭菌的磷酸盐缓冲液参考剂量(小鼠):200mg/kg给药处理:腹膜腔内注射
三、动物模型类型
1、心血管疾病动物模型
1、动脉粥样硬化(Atherosclerosis)动物模型
病理指标:血管内皮细胞活化,单核细胞黏附迁移至内膜下,巨噬细胞吞噬氧化修饰的脂蛋白转化为泡沫细胞、内膜中膜增生,最终形成粥样斑块或引起血管堵塞。
2、高脂肪血动物模型(hyperlipidemia)
病理指标:血液中总胆固醇或/和甘油三酯过高
3、高血压动物模型(Hypertension)
病理指标 :大鼠采用尾容积法测定清醒状态下大鼠的间接血压(收缩压)。血压在85~115mmHg范围为正常血压大鼠;各种造型处理后凡血压比处理前高20mmHg以上且高于115mmHg
2、消化系统疾病模型
常见的消化系统疾病模型种类有,慢性萎缩性胃炎,胃溃疡,十二指肠溃疡,胃癌,胰腺炎,结肠炎等
3、糖尿病动物模型
糖尿病diabetes;DM疾病简介:糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损,或两者兼有引起。疾病常见分型如下:
|型糖尿病(胰岛素依赖型)diabetes mellitustype1(insulin-dependent diabetes melitus;IDDM)1型糖尿病患者需依赖注射胰岛素存活。
2型糖尿病(非胰岛素依赖型)diabetes mellitus,type2(Noninsulin-dependent diabetes mellitusNIDDM)这一类型的糖尿病患者占总数的80%~90%。2型糖尿病原名叫成人发病型糖尿病
四、癌症诱导剂
利用化学因素引起细胞遗传性特异异常,可以制备动物肿瘤模型。
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