微生物限度检查仪薄膜过滤法是一种常用的微生物检测方法，可用于检测非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染的程度，其检测流程主要包括以下步骤：
准备工作
仪器与耗材准备：选择合适的微生物限度检查仪，并确保其处于正常运行状态。准备孔径一般为 0.45μm 的无菌滤膜、无菌滤杯、无菌吸管、无菌镊子、无菌平皿等耗材。
培养基准备：根据待检微生物的种类，准备相应的培养基，如营养琼脂培养基用于细菌培养，玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌和酵母菌培养。培养基需按标准配方配制，并进行灭菌处理。
样品准备：按照相关标准和规范采集具有代表性的样品。若样品为固体，需进行粉碎、溶解或稀释等处理;若为液体，可直接或经适当稀释后用于检测。
环境准备：检测应在洁净度符合要求的实验室环境中进行，如局部百级的万级洁净室内。实验前需对实验室台面、地面等进行清洁和消毒，操作人员应穿戴好工作服、口罩、帽子和手套，严格遵守无菌操作原则。
EJ-XDY-300B
过滤操作
安装滤膜：在无菌操作条件下，用无菌镊子将无菌滤膜放入滤杯的滤膜支撑板上，确保滤膜平整、无褶皱，然后安装好滤杯盖，保证密封良好。
样品过滤：用无菌吸管吸取适量样品溶液，注入滤杯中，启动微生物限度检查仪的真空泵，使样品溶液通过滤膜。若样品中微生物含量较高，可进行适当稀释后再过滤。过滤过程中应控制过滤速度，避免过快导致滤膜堵塞或微生物被冲过滤膜。
冲洗滤膜：样品过滤完毕后，用无菌冲洗液冲洗滤膜，以去除样品中的杂质和可能存在的抑菌物质。冲洗次数和冲洗液用量应根据样品的性质和检测要求确定，一般冲洗 3 - 5 次，每次冲洗液用量为 100ml 左右。
培养操作
接种培养基：过滤和冲洗结束后，用无菌镊子将滤膜取出，转移至相应的无菌培养基平皿上，滤膜接种面朝上，与培养基充分接触。若需检测多种微生物，可将滤膜剪成数块，分别接种于不同的培养基上。
培养条件设置：将接种好的培养基平皿置于适宜的培养箱中进行培养。细菌培养一般在 30 - 35℃下培养 3 - 5 天;霉菌和酵母菌培养在 20 - 25℃下培养 5 - 7 天。培养过程中应保持培养箱内的温度、湿度和气体环境稳定。
结果计数与报告
菌落计数：培养结束后，取出培养基平皿，肉眼观察并计数平皿上生长的菌落数。若菌落数较多，可采用菌落计数器或稀释后再计数。对于蔓延生长的菌落，应进行适当处理后再计数。
结果报告：根据菌落计数结果，计算每克(或每毫升)样品中的微生物数量。检测结果应按照相关标准和规范进行报告，报告内容包括样品名称、检测项目、检测方法、菌落数、检测结论等。
