什么是转染?

转染通常是指将核酸输送到真核细胞，或者更具体地，输送到动物细胞。术语“转染”一般用来表示原核生物感染病毒或噬菌体中病毒核酸的摄取，导致成熟病毒颗粒的感染和产生。但该术语现在的含义包括将外源性核酸人工导入细胞内。

转染的应用

转染的两个主要目的是生成重组蛋白，或特异性地增强或抑制转染细胞中的基因表达。因此，转染是一种功能强大的分析工具，可用于基因或基因产物的功能和调控研究，用于生成转基因生物，并可用作基因治疗方法。

转染的分类

将核酸导入细胞的生物、化学和物理方法有很多种。并非所有方法都均适用于所有的细胞类型和实验应用，不同方法的转染效率、细胞毒性、对正常生理学的影响和基因表达水平各异。

但是，所有转染策略均可分为两大类，其中一些导入核酸在细胞中存在一段时间（瞬时转染），而另一些则长时间存在于细胞中，并被传递至转染细胞的子代（稳定转染）。

瞬时转染

在瞬时转染中，导入核酸只在细胞中存在一段时间，且未整合至基因组。因此，在细胞分裂过程中，瞬时转染的遗传物质不会传递至下一代，而是会在环境因素影响下丢失或在细胞分裂过程中被冲淡。但是，在其存在于细胞期间，高拷贝数的转染遗传物质会引起蛋白质的高水平表达。

稳定转染

在稳定转染中，外源性DNA被整合至细胞基因组中，或者作为附着体质粒存在。与瞬时转染不同，稳定转染可使外源性DNA长期存在于转染细胞及其子代细胞中。

因此，稳定转染可以使导入基因在多代细胞中永久性地表达，适用于重组蛋白生产和外源性DNA表达的下游或长期效应分析。但是，通常只有单个或几个拷贝的外源性DNA被整合至稳定转染细胞的基因组中，所以稳定转染基因的表达水平一般低于瞬时转染基因的表达水平。

选择转染策略

您的实验时间和最终目标决定您应该选择瞬时转染还是稳转染。瞬时转染细胞一般在转染后24-96小时收集，常用于研究基因或基因产物的短期表达效应，执行RNA干扰（RNAi）介导的基因沉默，或快速生成小量重组蛋白。

相比之下，当需要长期基因表达或转染细胞需在多项实验中使用时，则更多地选择稳定转染。由于将DNA载体整合至染色体中的概率较低，细胞的稳定转染更麻烦、更具挑战性，需要选择性筛选和克隆分离。因此，稳定转染通常用于大规模 的蛋白质生产、长期药理学研究、基因治疗或长期基因调控机制研究。

瞬时转染与稳定转染特点对比