细胞生长曲线是细胞生物学研究中的一项重要工具，它直观展现了细胞在体外培养过程中的增殖动态，为诸多实验提供关键数据支持。下面就详细介绍其绘制步骤。
一、前期准备
首先，需要准备处于对数生长期的细胞。这要求操作人员熟练掌握细胞培养技术，包括培养基的配制、细胞的复苏、传代等操作，确保细胞状态良好。同时，准备足够数量的培养瓶或培养皿，一般根据实验设计及后续检测需求，准备 6 - 8 个平行样本。
还得配备精密的细胞计数仪器，如血球计数板或自动细胞计数仪，以及高质量的台盼蓝染液用于区分活细胞与死细胞。
二、细胞接种与培养
将细胞用胰蛋白酶消化后制成单细胞悬液，依据细胞种类及生长特性，以合适的细胞密度接种到培养容器中，标记好接种时间、细胞种类、接种浓度等关键信息。把接种后的细胞放入 37℃、5% CO₂ 的恒温培养箱中培养，为细胞生长营造稳定适宜的环境。
三、定期取样计数
从接种后的第 0 天开始，每隔 24 小时或特定时间间隔，取出 3 个平行样本。用胰蛋白酶消化使贴壁细胞脱落，制成单细胞悬液，取少量与台盼蓝混合后，利用计数仪器计数活细胞数量，记录每次的数据。
四、绘制生长曲线
以培养时间为横轴，活细胞数量（或细胞密度）为纵轴，将每日记录的数据在坐标纸上描点，再用平滑曲线依次连接各点，就得到了细胞生长曲线。通常，曲线可分为潜伏期、对数生长期、平台期。潜伏期细胞适应环境，增殖缓慢；对数生长期细胞快速分裂；平台期因营养消耗、接触抑制等，细胞增殖停滞。
绘制细胞生长曲线虽步骤严谨但并不复杂，只要严格把控每个环节，就能精准呈现细胞的生长轨迹，助力科研人员深入探究细胞的生命活动规律。
