春季细胞培养需要在温度、湿度、微生物污染等多方面加以注意,特别是假期刚回实验室要好好检查一番。
一、细胞培养环境控制
01温度
春季气温多变,细胞培养环境的温度需严格把控。一般来说,哺乳动物细胞培养的适宜温度为37℃,昆虫细胞培养一般在27℃左右。有条件的实验室可以使用精度较高的温控设备,如带有温控系统的培养箱,并定期进行校准,确保温度稳定。
02湿度
春季空气湿度不稳定,培养箱内的湿度通常应保持在95%左右。可通过在培养箱内放置无菌水盘等方式维持湿度,同时要定期检查水盘内的水量,及时补充,防止因水分蒸发导致湿度降低影响细胞生长。
03洁净度
春季是万物复苏的季节,空气中的微生物和灰尘等污染物增多。要定期清洁细胞培养室,使用紫外线灯对培养室进行定期消毒,一般每周2-3次,每次照射30分钟以上。特别是刚回到实验室时要进行清理,避免假期沉积的灰尘影响细胞。同时,有条件可配备空气净化设备,如空气净化器或层流罩,以保持培养环境的洁净。
二、细胞培养试剂检查
01培养基
检查培养基的有效期和外观,如发现变色、浑浊或沉淀,应弃用。配置好的培养基若暂时不用,需按照要求保存,一般在4℃冰箱中保存,且存放时间不宜过长,避免营养成分降解或被微生物污染。
02血清
血清是细胞培养中重要的营养来源,使用前需在37℃水浴中快速融化,并注意观察是否有沉淀或浑浊现象。融化后的血清应尽快使用,若一次用不完,应分装后于-20℃保存,避免反复冻融。
三、仪器设备维护
01培养箱
除了前面提到的温度和湿度控制外,还要定期检查培养箱的二氧化碳浓度,一般二氧化碳培养箱的二氧化碳浓度设定为5%。同时,要定期清洁培养箱内部,去除污垢和微生物,防止交叉污染。
02显微镜
定期对显微镜进行校准和清洁,确保其成像清晰,以便准确观察细胞的形态和生长状态。
03离心机
检查离心机的转速和离心力是否准确,以及转子是否平衡。使用过程中要注意按照操作规程放置离心管,避免因不平衡导致仪器损坏或细胞离心效果不佳。