在免疫学与肿瘤研究领域，RAW264.7细胞堪称实验室的“明星工具”。这种源自小鼠单核巨噬细胞的白血病细胞系，因其易于培养、功能多样，成为探索炎症、吞噬作用及癌症机制的理想模型。本文将从其特性、应用及操作要点展开解析。
RAW264.7细胞于1975年从BALB/c小鼠的腹腔巨噬细胞中分离，经Abelson鼠白血病病毒诱导永生化，具备以下特性：
形态特征：贴壁生长，呈圆形或梭形，激活后可伸出伪足；
功能特性：保留巨噬细胞吞噬功能（如吞噬荧光微球效率达70%），并响应脂多糖（LPS）分泌TNF-α、IL-6等炎症因子；
遗传背景：表达TLR4、CD14等模式识别受体，常用于NF-κB、MAPK信号通路研究。
二、科研应用场景炎症与免疫调控
LPS诱导模型：用100 ng/mL LPS刺激24小时，TNF-α分泌量可升高20倍，模拟脓毒症等炎症反应；
药物筛选：通过检测NO释放水平（Griess法），评估抗炎药（如地塞米松）的抑制效率。
肿瘤微环境研究
巨噬细胞极化：IL-4诱导M2型极化（CD206表达↑），IFN-γ联合LPS诱导M1型（iNOS表达↑）；
癌细胞互作：与4T1乳腺癌细胞共培养后，RAW264.7分泌的VEGF促进肿瘤血管生成。
病原体感染机制
细菌吞噬：可吞噬大肠杆菌、金黄色葡萄球菌，用于抗生素疗效评价；
病毒应答：感染流感病毒后，RIG-I通路激活干扰素分泌。
培养基选择
基础培养基：DMEM高糖（含10% FBS + 1%双抗），pH 7.2-7.4；
传代比例：1:3至1:5，每2-3天传代一次，避免过度融合（>90%抑制增殖）。
关键注意事项
支原体防控：每月用PCR检测，推荐使用BM Cyclin预处理（2 μg/mL，48小时）；
表型稳定性：连续传代超过30代后，吞噬能力可能下降，建议冻存早期代次；
冻存策略：90% FBS + 10% DMSO，程序降温至-80℃后转液氮保存，复苏存活率＞85%。
四、局限性及解决方案种属限制：小鼠来源限制其在人源化研究中的应用，可联用人THP-1细胞对比分析；
活化变异：不同批次血清可能影响活化状态，建议固定供应商并预筛选血清；
功能单一性：无法完全模拟体内巨噬细胞异质性，可结合原代细胞验证关键结论。
RAW264.7细胞凭借其功能可塑性，已成为连接基础研究与临床转化的桥梁。然而，科学使用时需警惕其永生化带来的生物学偏差。通过合理设计实验（如与原代细胞交叉验证），这一“老牌”细胞系仍将在免疫治疗、肿瘤学及感染性疾病研究中持续发光。
在免疫学与肿瘤研究领域，RAW264.7细胞堪称实验室的“明星工具”。这种源自小鼠单核巨噬细胞的白血病细胞系，因其易于培养、功能多样，成为探索炎症、吞噬作用及癌症机制的理想模型。本文将从其特性、应用及操作要点展开解析。
