上海富衡|细胞吐泡泡——什么是细胞空泡化?

小衡衡 2025-01-07 15:12:05

细胞空泡化是指在细胞内部形成空泡或液泡结构的一种现象。这些空泡通常具有不同于细胞质的光学特征,因此在显微镜下可以清晰观察到。

01、细胞结构

目前的研究认为,细胞内的空泡一般来源于细胞内所有膜结构的细胞器,如线粒体、内质网、溶酶体、高尔基体、自噬溶酶体等。

比如:

1、线粒体:作为细胞的“能量工厂”,线粒体在功能异常或受损时可能形成空泡。

2、内质网:内质网负责蛋白质的合成和修饰,当其功能发生紊乱时,也可能导致空泡的形成。

3、溶酶体:溶酶体内含有多种水解酶,用于分解和消化细胞内的废物和有害物质。当溶酶体受损或功能异常时,其内的水解酶可能泄露,导致细胞器空泡化。

4、高尔基体:高尔基体参与蛋白质的后期加工、分类和包装。在特定条件下,高尔基体也可能发生空泡化。

5、自噬溶酶体:自噬是细胞自我消化的一种过程,涉及将受损或多余的细胞器包裹进自噬小体,并与溶酶体融合形成自噬溶酶体进行降解。如果这一过程出现异常,也可能导致空泡的形成。

02、空泡产生原因以及处理

那么,在细胞培养过程中,我们要怎么分析和应对细胞的空泡化呢?

以下是对细胞空泡化的详细解析:

1、细胞空泡产生原因

在实际培养过程中,我们会发现有许多细胞本身就会出现一些特殊的细胞空泡。

比如CACO2 细胞,正常培养状态下,就会形成巨大的细胞空泡。

图片来源:富衡生物

图片来源:ATCC

如果细胞正常培养情况下,无空泡,或者只有少量空泡,就要从以下几个方面考虑:

1、细胞老化

原代培养时细胞处于终末分化状态,不会再分裂。如果培养时间过长,细胞就会因老化而空泡化,甚至导致死亡。对于传代细胞,如果传代次数过多,也可能因老化而产生空泡。

2、培养液问题

培养液配制错误、过期储存、储存不当,或血清质量不合格等原因,都可能引起培养液的渗透压与PH值发生改变,从而影响细胞状态,导致细胞空泡化。

3、细胞消化操作不当

胰酶消化时间过长或吹打时力度过大,都可能损伤细胞,进而引发细胞空泡化。

4、培养基更换不及时

细胞在培养过程中需要充足的营养。如果不及时更换培养基,细胞可能会因营养物质的不断消耗和代谢产物的积累而缺乏营养,导致饥饿诱导形成自噬,从而产生空泡化。

5、污染

化学物质、细菌、病毒或支原体等污染可能导致细胞状态不稳定,从而引发细胞空泡化。

6、药物诱导

一些特定的药物处理也可能导致细胞质空泡化,这通常是观察细胞变化而对细胞进行的特殊处理。

2、解决方法

对于细胞老化引起的空泡化,可以使用代数较靠前的细胞进行实验,并尽量避免长时间的体外培养。

确保培养液的正确配制和使用,使用新鲜培养液,并定期更换培养基以维持适当的渗透压和PH值。同时,选择质量好的血清。

在细胞消化和传代过程中,选择适当浓度的胰酶和消化时间,并避免过度吹打操作以保护细胞完整性。

定期更换培养基以确保细胞获得足够的营养。通常每2-3天更换一次新鲜培养基。

严格执行无菌操作规范,使用无菌试剂和耗材,并定期检测细胞是否受到污染。一旦发现污染,立即采取适当的处理措施。

3、细胞空泡化是否可逆性

细胞空泡化可分为可逆性和不可逆性两种情况。可逆性空泡化是指细胞在特定条件下形成空泡,但一旦这些条件改变,细胞可以恢复到正常状态。而不可逆性空泡化则是指细胞在受到严重损害或应激后无法恢复到正常状态。

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小衡衡

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一个从事生物科技,专注于细胞相关技术、服务的打工仔