细胞是目前人类能够驾驭的最小生物工厂，细胞培养则成为了生命科学研究领域不可或缺的一环。
今天，就跟着小富学姐，来了解一下“细胞培养过程中可能遇到的细胞污染及处理方法”吧！
暑期工作部署
01
细菌污染
· 特征
1、培养基可能在4-6小时内呈现混浊。
2、稍加震荡，便会有很多混浊物漂起。
3、显微镜下呈黑色细沙状，或背景有大量黑点。
· 处理方法
1、轻度细菌污染：可用10X双抗清洗处理。
2、重度细菌污染：建议消杀后丢弃。
02
真菌污染
· 特征
1、最短3天才能长出椭圆形的霉斑。
2、霉斑漂浮在培养液表面，随时间逐步扩大。
3、显微镜下可观察到菌丝体。
· 处理方法
真菌污染较难根除，且真菌孢子易飘散，污染实验室，不建议保留，建议消杀后丢弃。
03
霉菌污染
· 特征
1、霉菌污染通常表现为培养液中出现白色、灰色或黑色的菌落。
2、菌落可能漂浮在培养液表面，也可能附着在细胞培养瓶的壁上。
· 处理方法
1、立即丢弃受污染的细胞和培养基。
2、使用温和的洗涤剂（如10%的84消毒液）彻底清洗培养设备和实验台。
3、使用紫外线灯或臭氧发生器对实验室进行消毒处理。
04
支原体污染
· 特征
1、支原体是最小的微生物，直径仅50-300nm，无法通过光学显微镜看见，但可通过电镜观察到。
2、增殖减慢，上清液清澈，背景干净，细胞形态异常（拉丝、铺展）。
· 处理方法
1、若细胞污染后状态尚可，添加支原体抑制剂培养2-3代可转阴。
2、若细胞污染后状态很差，建议消杀后丢弃。
05
黑胶虫污染
· 特征
1、黑胶虫污染后培养液颜色不变化，也不浑浊。
2、显微镜下观察细胞间隙存在布朗运动的黑色异物。
3、黑色异物可能是点状或杆状的等。
4、与细胞生长呈现出“此起彼伏”的状态。
5、换液清洗无效。
· 处理方法
由于黑胶虫污染的特征和处理方法未在参考文章中明确提及，通常需要根据具体情况采取适当的处理措施，如更换培养基、清洗培养设备等。
06
细胞交叉污染
· 特征
1、交叉污染指2种或2种以上的细胞相互污染，无法分离培养。
2、显微镜下发现细胞生长异常、形态变化，或细胞实验实验中发现细胞功能改变。
3、通常需要进行STR鉴定才能确定。
· 处理方法
1、一旦发现交叉污染，应立即停止使用该细胞系，并追溯可能的污染源。
2、对于已经污染的细胞系，应全部丢弃，并重新从原始来源或可靠的细胞库获取。
3、加强实验室的细胞管理，确保不同细胞系之间有明确的标识和隔离措施。
07
病毒污染
· 特征
1、病毒污染可能导致细胞生长缓慢、形态异常或细胞死亡。
2、病毒污染通常难以通过肉眼或显微镜直接观察到，但可以通过细胞病变效应（CPE）或特定的检测方法（如PCR）来检测。
· 处理方法
1、立即停止使用受污染的细胞系，并丢弃所有受污染的培养基和细胞。
2、使用温和的洗涤剂彻底清洗培养设备和实验台。
3、如果实验室中存在其他细胞系，应将其隔离并检测是否受到病毒污染。
4、如果病毒污染严重或涉及高危病毒，应立即通知相关机构和部门进行处理。
.养好细胞，预防大于处理！
1、严格遵守实验室的清洁和消毒规程，确保实验设备和环境的无菌状态。
2、定期对实验设备进行维护和校准，确保其正常运行和准确性。
3、加强对实验人员的培训和教育，提高他们的无菌操作意识和技能。
4、严格管理细胞系的来源和存储，确保细胞系的纯度和可靠性。
5、定期进行细胞质量检测，及时发现和处理细胞污染问题。
