THP-1细胞是从一名患有急性单核细胞白血病的1岁小男孩的外周血中分离得到的人单核细胞白血病细胞,也被称作Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞。该细胞系由Tsuchiya等人于1980年建立,被广泛用于单核细胞和巨噬细胞相关的机制、信号通路以及营养和药物运输等研究,是研究免疫和炎症的理想工具。
THP-1细胞形态
THP-1细胞是悬浮生长的细胞,在显微镜下观察,细胞形态包括圆形和多边形,细胞直径约为12-14微米,细胞中有少量嗜碱性的胞浆,胞浆中含有少量嗜蓝颗粒和少量液泡,细胞核呈锯齿状,形状不规则。
THP-1细胞的培养
在培养THP-1细胞时,需要注意以下几点:
THP-1细胞在偏酸性环境中生长更快,所以当培养基稍微变黄(呈橘红色)时,是适合细胞生长的,此时可以进行补液或半换液。
THP-1细胞培养液中需添加β-巯基乙醇(细胞培养级别),若不添加,可能会对细胞状态造成影响。
THP-1细胞对血清质量较为敏感,建议使用优质胎牛血清进行培养。
THP-1细胞复苏初期,细胞生长较为缓慢且会有部分细胞破碎,出现黑色细胞碎片,但少量细胞碎片不影响细胞正常生长,待细胞恢复正常生长速度后可用半换液法稀释碎片。
THP-1 的诱导分化
THP-1 是体外研究原代人巨噬细胞功能中使用最广泛的细胞系。原因是在使用 PMA 分化 THP-1细胞后,它们获得了一种类似巨噬细胞的表型,该表型在许多方面类似于原代人巨噬细胞(M0 巨噬细胞)。PMA 是蛋白激酶 C (PKC) 的有效激活剂,而PKC 是巨噬细胞分化的关键调节因子。
当 PMA 添加到 THP-1 细胞中时,它使它们表达表面标志物 CD14、CD16 和 CD68,这是 M0 巨噬细胞的特征。PMA 还诱导 M0 巨噬细胞产生促炎细胞因子。在被诱导为M0细胞后,继续用 PMA 联合其他因子进一步处理,就可以激活 M0 巨噬细胞并将其分化为 M1 或 M2 巨噬细胞。
具体诱导过程见下图
图片引用自:https://www.caltagmedsystems.co.uk/information/pma-standard-reagent-for-thp1-cell-differentiation/
在实际实验过程中,THP-1的状态是影响诱导效果的最大因素。此外,由于诱导时间较长,随时关注诱导过程中的细胞状态,也十分关键。针对这一难点,富衡推出THP-1成巨噬细胞诱导试剂盒,试剂盒中不仅包括各阶段诱导试剂,也包括一株性能稳定的THP-1细胞。
富衡THP-1成巨噬细胞诱导试剂盒效果展示
THP-1成巨噬细胞诱导分化试剂盒用于将THP-1细胞系分化为巨噬细胞(M1或M2型)。试剂盒包含细胞及各阶段诱导液。分化过程包括培养THP-1细胞,将THP-1诱导为M0型巨噬细胞,再进一步诱导细胞,使其极化为M1或M2型巨噬细胞。该试剂盒为科研提供了一种便捷、稳定的巨噬细胞模型获取方法。