在免疫荧光 IF（Immunofluorescence）实验中，细胞是否一定要进行固定和通透是一个关键的技术考量点。

固定，是免疫荧光 IF 实验中至关重要的一个步骤。通过固定细胞，可以有效地将细胞的结构和蛋白质等生物分子稳定在原位，防止其在后续的操作过程中发生移位或降解。固定能够保持细胞形态的完整性，使得我们在显微镜下观察时能够得到清晰且真实反映细胞状态的图像。例如，常用的多聚甲醛固定剂能够与蛋白质的氨基等基团发生交联反应，从而将细胞内的蛋白质牢固地固定在细胞内的相应位置。没有固定这一步骤，细胞在后续的漂洗、染色等操作中很可能会破裂或者其内部结构会被破坏，导致无法准确地进行免疫荧光标记和观察。

然而，对于一些特殊的研究目的或者特定的细胞类型，固定也可能会带来一些潜在的问题。比如，过度的固定可能会导致某些抗原表位被掩盖，影响后续抗体与抗原的结合，从而降低免疫荧光信号的强度。因此，在选择固定剂和固定条件时，需要根据实验的具体需求进行优化。

通透也是免疫荧光 IF 实验中一个重要的环节，但并非所有情况下都是必需的。通透的主要目的是增加细胞膜的通透性，使得抗体能够更容易地进入细胞内部，与细胞内的抗原结合。对于一些位于细胞内的抗原的检测，通透步骤是必不可少的。例如，在检测细胞内的某些信号分子或者细胞器相关蛋白时，需要使用适当的通透剂如 Triton X-100 等处理细胞，以打破细胞膜的屏障，让抗体能够顺利进入细胞内部。但是，对于细胞膜表面抗原的检测，过度的通透反而可能会破坏细胞膜的完整性，导致非特异性的抗体结合增加，影响实验结果的准确性。

在实际的免疫荧光 IF 实验中，我们需要根据研究的目标抗原的位置以及细胞的特性来综合判断是否需要进行固定和通透。如果是研究细胞膜表面的蛋白，可能只需要进行适当的固定，而无需进行通透处理；如果是研究细胞内的蛋白，则需要在固定之后进行通透操作。同时，还需要注意固定和通透的条件和时间，以确保既能有效地暴露抗原，又不会对细胞结构和抗原的活性造成过度的破坏。

总之，在免疫荧光 IF 实验中，细胞的固定和通透是需要根据具体情况进行谨慎选择和优化的关键步骤，只有这样才能获得准确、可靠的实验结果。